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高床保育舍空气微生物检测简易方法

发布日期:2016-10-11点击次数:532

     高床保育舍/仔猪舍由于空间电场净化微生物气溶胶的特殊性(空气微生物荷电后做趋向培养皿的定向移动)故不能采用常规的落菌检测方法,故在此处推荐采用以下简易定量测定法。如有条件,则可以采用空气微生物采样器进行采样测定。
 
实验分析:本实验采用简易定量测定法,用无菌注射器定量抽取空气,将所取空气压入培养基内部,经培养后,即可定量、定性测定空气中细菌、真菌等微生物,此法简单易行。
 
采样点:设猪床下方15cm为采样区域,各点每天分别选在8:00、11:00、15:00、20:00、22:00进行,连续2-3天,按照“田”字形进行样品的采集,菌落数取平均值。
 
    实验一、细菌总量的测定
 
1、实验仪器:无菌注射器、无菌培养皿、温湿度培养箱。
 
2、实验试剂:营养琼脂培养基。
 
3、实验步骤:
 
(1)按比例配制培养细菌用的营养琼脂培养基,灭菌后融化,在50℃水浴中保温备用。
 
(2)利用50~100mL无菌注射器抽取待测环境空气20~100ml。
 
(3)在无菌操作下,取已融化培养基倒入无菌平皿中,平皿稍作倾斜,将注射器插入培养基深处,缓慢将空气压入培养基内,轻轻摇匀以消除气泡。待培养基凝固,置于30℃恒温箱中培养3d后统计细菌菌落数量,推算1L空气所含细菌量。。
 
4、环境因素测定:采样同时记录猪舍内外相对温度和湿度。
 
5、实验结果:
 
计数菌落形成单位数(CFU),空气中微生物浓度按奥梅梁斯基氏法计算。
 
微生物密度测定记录:将计算结果填入表。
 
6、按平均值绘制日变化曲线。
 
7、对照舍重复以上步骤。
 
   实验二、真菌总量的测定
 
1、实验仪器:无菌注射器、无菌培养皿、温湿度培养箱。
 
2、实验试剂:PDA培养基。
 
3、实验步骤:
 
(1)配制培养真菌用的PDA培养基,灭菌后融化,在50℃水浴中保温备用。
 
(2)利用50~100mL无菌注射器抽取待测环境空气20~100ml。
 
(3)在无菌操作下,取已融化培养基倒入无菌平皿中,平皿稍作倾斜,将注射器插入培养基深处,缓慢将空气压入培养基内,轻轻摇匀以消除气泡。待培养基凝固,置于30℃恒温箱中培养5d后统计真菌菌落数量,推算1L空气所含真菌量。统计霉菌数量时培养的时间稍许延长。应用此法需多做平行试验,求其平均值以提高准确性。
 
4、环境因素测定:采样同时记录猪舍内外相对温度和湿度。
 
5、实验结果:
 
计数菌落形成单位数(CFU),空气中微生物浓度按奥梅梁斯基氏法计算。
 
微生物密度测定记录:将计算结果填入表
 
6、按平均值绘制日变化曲线。
 
7、对照舍重复以上步骤。
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